肽对体抗 即胃肠道损伤
本文主要内容摘自 ：冯志远,小麦刘丹,张卓然,等.小麦肽对非甾体抗炎药致肠损伤的修复作用[J].中国食品学报,2023,23(12)
:97-104.DOI:10.16429/j.1009-7848.2023.12.011.非甾体抗炎药 （non-steroidal anti-inflammatory drugs，NSAIDs）是肽对体抗一类具有抗炎、镇痛作用的非甾复作药物 ， 在临床实践中广泛应用于预防心脑血管疾病[1] 、炎药用结直肠癌[2]和阿尔茨海默症[3-4]等疾病发生。致肠研究表明 ，损伤香肠派对官方官网下载NSAIDs 药物摄入会产生胃、小麦肠道副作用 ，肽对体抗 即胃肠道损伤 ，非甾复作长期使用会增加小肠出血、炎药用溃疡 、致肠 通透性增加以及肠炎的损伤发生[5] 。
试验研究表明 ，小麦用于治疗 NSAIDs 引起的肽对体抗胃损伤药物 ，如质子泵抑制剂（PPI） 、非甾复作组胺 H2 受体拮抗剂（H2RAs） ，会加重 NSAIDs 引起的小肠损伤[6-7] 。 目前 ，还没有药物可有效治疗 NSAIDs 引起的肠道疾病，这是由于 NSAIDs 导致肠道疾病发生的原因是多样的 ，包括肠道运动增加 ，黏液分泌减少 ，INOS/NO 表达升高 ，以及抑制 COX 导致的 PGs 生成减少等[8-9]。 单一靶向性药物对 NSAIDs 造成的肠道损伤治疗作用有限 。
近年来 ， 天然活性物质对肠道损伤的改善作用得到广泛关注 。 研究证明 ， 姜黄素可通过预防 NSAIDs 诱导的胃肠道 pH 值降低、肠组织内脂质过氧化和氧化应激改变等方式来改善 NSAIDs 诱导的胃肠道损伤[10]。 Chao 等[11]通过给予小鼠双氯芬酸钠的方式 ，建立 NSAIDs 诱导的胃肠道损伤模型 ，证明小檗碱可以保护肠道免受 NSAIDs 诱导的损伤 ，其机制可能与激活 GFAP 、PGP9 有关 。香肠熊猫科技免费挂 食品衍生生物活性肽作为天然活性物质中的一类 ，被证明具有抗高血压 、抗菌、抗氧化 、免疫调节等多种生物活性[12-13] 。 多种生物活性肽被证明与改善肠道免疫系统[14]，修复肠黏膜屏障 ，增殖肠上皮细胞有关[15] 。
小麦肽是小麦蛋白粉（谷朊粉）经蛋白酶水解得到的一种小分子生物活性多肽 ， 具有抗氧化活性 、ACE 抑制活性 、本尊科技免疫活性等生物活性 。 小麦肽中富含谷氨酰胺 ， 谷氨酰胺作为肠黏膜细胞新陈代谢重要的能量物质 ， 具有维持肠道屏障的结构和功能等重要作用。 目前小麦肽对消化道的保护机制尚不清楚 。 基于之前的研究 ，本试验探究小麦肽对非甾体抗炎药损伤肠道的影响 。
01.研究方法
雄性 KM 小鼠按体质量随机分为 6 组 ，分别为空白组（灌胃生理盐水） 、双氯芬酸钠组（灌胃双氯芬酸钠） 、谷氨酰胺组（双氯芬酸钠+谷氨酰胺）、小麦肽低、中 、高剂量组（双氯芬酸钠+3 种不同剂量小麦肽），每组 10 只 ，连续处理 21 d 。 末次灌胃后禁食 12 h，称重 。 随后对小鼠进行取血，用于氧化应激水平和肾上腺素 E2（PGE2）检测 。 收集小鼠小肠组织 ，用于组织病理学检测 。 免疫蛋白印迹法检测肠组织紧密连接蛋白的香肠免费直装科技(防封)表达量 。
02.结果与分析
体质量变化和饲料摄入量
图 1a 表示 21 d 中小鼠体质量变化及每组小鼠每日饲料平均摄入量 ，21 d 内各组小鼠平均饲料摄入量不存在显著区别 ， 说明小鼠体质量变化没有受到饮食量的影响 。
图 1b 反映了 21 d 不同处理方法对小鼠体质量变化的影响 ， 在小鼠灌胃双氯芬酸钠 1~5 d ，与空白组相比 ，双氯芬酸钠灌胃处理小鼠体质量增长速度显著降低 。 且在 5~21 d，双氯芬酸钠组小鼠体质量增长速度显著低于谷氨酰胺和小麦肽处理组 。 其中 ，空白组小鼠体质量明显高于双氯芬酸钠处理小鼠， 证明灌胃双氯芬酸钠可以抑制小鼠体质量增长 ， 小麦肽组及谷氨酰胺组的小鼠体质量低于空白组 ， 但显著高于双氯芬酸钠组；表明在饲料摄入量相同的情况下 ，小麦肽和谷氨酰胺摄入可改善双氯芬酸钠灌胃对小鼠体质量增长的抑制 。
血清生化指标分析
小鼠血清中 MDA 含量如图 2a 所示 ，小鼠在接受双氯芬酸钠灌胃后 ，与空白组相比 ，双氯芬酸钠组小鼠血清中 MDA 含量明显上升（P＜0.05） ，这说明双氯芬酸钠处理会导致小鼠体内发生严重的氧化损伤 。在谷氨酰胺和小麦肽处理后 ，与双氯芬酸钠组相比小鼠血清中 MDA 的含量显著下降，其中 ，小麦肽中 、高剂量组小鼠血清中 MDA 含量的降低效果要优于谷氨酰胺组。且与空白组小鼠血清中 MDA 水平无明显差异 。 图 2b 显示 ，双氯芬酸钠灌胃显著抑制了小鼠血清中 MPO 的活性（P＜0.05） ，除小麦肽中剂量组外，谷氨酰胺和小麦肽高 、低剂量组均改善了双氯芬酸钠对 MPO 活性的抑制作用，使其恢复至正常水平 ，这些结果表明小麦肽可以有效降低双氯芬酸钠引起的小鼠机体内部氧化应激水平和炎症水平 ，维持小鼠健康状态 。香肠派对水花直装过氧化氢酶可以保护细胞免受机体代谢产生的过氧化氢的毒害 ，是生物防御体系的关键酶之一 。
图 2c 显示 ，双氯芬酸钠组小鼠血清中 CAT 酶活力显著提高（P＜0.05），谷氨酰胺和小麦肽处理后 CAT 酶活力较阴性对照组活力有一定程度的下降 ，其中小麦肽高剂量组效果最为明显 。 这说明双氯芬酸钠处理后 ，小鼠体内产生严重氧化反应 ， 促进了过氧化氢酶活性提高， 而小麦肽和谷氨酰胺干预有效减轻了这种损伤 。 小鼠血清中 GSH-PX 酶活力如图 2d 所示，与空白组相比 ， 在双氯芬酸钠处理后血清中 GSH-PX 酶活力被显著抑制（P＜0.05） 。 谷氨酰胺和小麦肽处理提高了双氯芬酸钠造成的 GSH-PX 酶活力降低，其中 ，谷氨酰胺组和玉米肽高剂量组 GSH-PX 酶活力提高具有显著性（P＜0.05） 。 这说明双氯芬酸钠处理后，小麦肽和谷氨酰胺干预可以通过提高 GSH-PX 酶活力 ，降低小鼠机体内氧化损伤。
血清 PGE2 含量改变
如图 3 所示 ， 双氯芬酸钠处理会显著降低小鼠体内 PGE2 含量（P＜0.05） ，PGE2 一种重要的细胞生长和调节因子同时具有免疫抑制和抗炎黏膜作用。 双氯芬酸钠具有抑制环氧合酶 1 的效果 ，进而抑制 PGE2 生成 ，PGE2 在机体内发挥重要作用的调节功能 ，参与多种生理过程 。在胃肠道中， PGE2 是防御和修复的重要介质 。与双氯芬酸钠组相比 ，谷氨酰胺和小麦肽处理有效提高了小鼠体内 PGE2 含量 ， 且小麦肽高组作用效果具有显著性（P＜0.05） ，表明小麦肽可以通过提高小鼠机体内 PGE2 表达 ，促进双氯芬酸钠导致的胃肠黏膜损伤修复。
肠道组织病理学分析
为了评估小麦肽在双氯芬酸钠诱导的肠黏膜结构损伤中的保护作用 ，小鼠肠道组织 HE 染色 如图 4 所示，空白组小鼠肠道组织结构良好 ，具有排列整齐完整的绒毛和隐窝细胞 。 双氯芬酸钠组小肠绒毛断裂受损严重 ，高度明显降低 ，并伴有肿胀现象，隐窝深度明显增加，并且黏膜中存在炎性细胞浸润。灌胃谷氨酰胺和小麦肽均会促进肠壁恢复 ，减轻双氯芬酸钠造成的肠黏膜损伤 ，谷氨酰胺组小肠绒毛结构完整 ，隐窝深度浅，但伴随少量的小肠绒毛脱落和部分绒毛萎缩 。小麦肽低剂量组和中剂量组都伴随部分香肠绒毛脱落 ， 其中小麦肽低剂量组伴随小肠绒毛肿胀和隐窝深度增加现象 。 小麦肽高剂量组小肠结构完整，部分小肠绒毛存在萎缩现象 。 这些结果表明小麦肽处理显著改善了小肠黏膜损伤 ， 小麦肽的小肠保护能力高于谷氨酰胺 。
小鼠肠组织紧密连接蛋白表达
紧密连接蛋白位于上皮细胞顶端 ， 作为肠上皮细胞的主要连接方式 ，起到维持黏膜屏障通透性的作用 。
如图 5 所示， 小鼠肠道紧密连接蛋白 ZO-1 和 OCCLUDIN 在双氯芬酸钠处理后表达量显著降低 ，这说明小鼠肠道黏膜屏障受到严重损伤 ，肠黏膜保护作用下降。在小麦肽的干预下 ，与双氯芬酸钠组相比 ，两种蛋白表达量均有提高 ，且发现小麦肽中剂量组两种蛋白表达量最显著 。这些结果证明 ， 小麦肽饮食干预可有效改善药物造成的肠道黏膜上皮屏障受损 ，维持肠上皮细胞完整性。
紧密连接蛋白对肠道黏膜损伤修复非常重要，作弊菜单(悬浮球)香肠派对可参与肠上皮细胞的基因转录、细胞增殖和分化状态的调节 ， 能够有效减少因肠黏膜受损引发的炎症性肠病 、腹泻 、癌细胞转移等多种疾病的发生。
03.讨论与结论
在本研究中，通过小麦肽预处理来研究小麦肽对 NSAIDs 肠病的保护作用 。 试验结果表明 ，小麦肽可显著改善 NSAID 引起的小鼠体质量降低 ，改善机体内氧化还原状态 ，保护小肠上皮组织结构完整，增强小肠组织紧密连接蛋白表达 。结果证 实 ，小麦肽可通过多种途径改善 NSAIDs 肠病 ，维持机体健康状态 。
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